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人工脂质膜重组电生理系统

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  • 人工脂质膜重组电生理系统

    产品描述: 德国Ionovation公司生产的Ionovation scout人工脂质膜重组电生理分析系统,是该领域最新的产品之一,该产品克服了传统膜片钳的一系列缺点,无论从产品的技术含量还是从产品的应用领域上来看,在电生理分析技术中始终处于领先的地位,代表着电生理分析技术发展的方向,是国内外细胞电生理分析实验室首选实验仪器。这种高度灵活的桌面检测系统可适应多种实验条件,目前已经被用于对细胞膜离子通道、多种动物和植物转运蛋白和它们的细胞器进行研究。
    德国Ionovation公司生产的Ionovation scout人工脂质膜重组电生理分析系统,是该领域最新的产品之一,该产品克服了传统膜片钳的一系列缺点,无论从产品的技术含量还是从产品的应用领域上来看,在电生理分析技术中始终处于领先的地位,代表着电生理分析技术发展的方向,是国内外细胞电生理分析实验室首选实验仪器。这种高度灵活的桌面检测系统可适应多种实验条件,目前已经被用于对细胞膜离子通道、多种动物和植物转运蛋白和它们的细胞器进行研究。
    Ionovation scout 技术特点:
    不需要建立千兆欧姆的封阻
    是唯一一种采用双层封阻的测量方式
    可用于检测各种细胞膜上的离子通道、囊泡、配体
    容易实现对单个离子通道进行分析检测
    可以在膜的两侧改变条件,形成双信道进行分析
    技术原理:
    Ionovation Scout采用了人工生物脂质膜来构建离子通道的测量方法。该系统使用两个独立的电生理测量室进行测量。该双层室由一个25μm厚、直径120微米的聚四氟乙烯隔膜隔开(a)。两个聚碳酸酯小室的体积分别为1.2 ml。聚碳酸酯小室顶部有孔,方便接入的Ag / AgCl电极和注入缓冲液(a)。当两个腔室中填充有合适的缓冲液时,溶解在正癸烷的脂质被分散到直径120微米的特氟隆隔膜的微孔( b)中。缓冲液的液面经过连续地降低和升高过程,直到特氟隆隔膜上的过量脂质被除去,特氟隆隔膜上形成脂双层自组织形成的人工生物脂质膜(C)。
    然后根据具体的目的蛋白或者细胞器等进行操作。比如类似于α-溶血素的毒素,可以直接加入聚碳酸酯小室中进行测试。而需要重组的离子通道则需要将其与脂肪酸结合为重组脂蛋白,然后将这些脂蛋白或者从生物膜上“剪下”囊泡与人工生物脂质膜通过离子梯度或融合肽方法进行融合。
    准备好样品后,开始进行电生理学测试。通过施加不同的电压,来监测细胞单离子通道的电流,其中在5-10 kHz带宽的信号会存储在系统的硬盘上,测试通常采用的模式是电压钳模式(voltage clamp mode),这种模式下应用不同的电压来得到目的信号。

    应用领域:
    1.脂质触发器
    2.细胞膜转运处理
    3.膜活性剂比如突触核蛋白
    4.药物安全分析
    5.信号转导模式分析
    应用案例
    Ionovation Scout测试系统可用于多种离子通道的分析:
    1. 测量对象:可实现对上万种离子通道、转运体和孔隙活动的精确测量;
    2. 软件:电生理数据采集分析软件Patchmaster,采用用户界面友好的软件实现测量全部控制;具备预定义协议式的用户定义实验工作流程;
    3. 自动操作:全自动设备操作(双层生产和验证、双层完整性的电容控制、膜双侧灌注系统);双层分子可视化操作;
    4. 电流测量:稳定低噪声Ag/AgCl电极,采用盐桥记录电流范围从pA到几个nA
    5. 耗材:一次性双分子层室可简单、快速置换;
    详细参数